［摘要］　目的：探讨龈沟液中白细胞介素8（IL-8）的来源及IL-8与成人牙周炎的关系。方法：用ELISA法检测了30份血清样本（13例牙周健康者，17例成人牙周炎患者血清）和27份龈沟液样本（9例牙周健康者，18例成人牙周炎患者）中IL-8的水平。用免疫组织化学的方法检查了IL-8分泌细胞在牙龈组织中的分布（7例健康牙龈组织，18例成人牙周炎牙龈组织)。结果：成人牙周炎患者中血清IL-8的检出率（47%，8/18）显著高于健康人血清中IL-8的检出率（7.7%，1/13），P<0.05；患者血清与患者龈沟液，健康者血清与健康者龈沟液之间，血清中IL-8的含量均显著低于龈沟液(P＜0.01)。IL-8阳性细胞分布于牙龈的口腔龈上皮、结缔组织及沟内的上皮中；且结缔组织及沟内上皮中的IL-8阳性细胞数量，成人牙周炎组显著高于健康对照组。结论：龈沟液中的IL-8主要来源于局部牙龈组织。IL-8参与了牙周炎的病理过程。
［关键词］　龈沟液；　白细胞介素8；　血清；　成人牙周炎

　　中性白细胞(PMNs)是聚集于急性炎症部位最多的一种细胞，它不仅有保护作用，在病理情况下也参与了组织的破坏。白细胞介素8(interlukin 8,IL-8)为一主要由单核细胞分泌的中性白细胞趋化因子［1］。Payne等［2］从牙周炎龈沟液中检出IL-8。本文旨在明确龈沟液中IL-8的来源，牙周炎病变组织中IL-8阳性细胞的组织学分布及其与临床指标

材料和方法

　　1. 血清及牙龈组织：血清及牙龈组织均来源于北京医科大学口腔医学院门诊初诊患者。成人牙周炎患者血清17例(女/男为6/11)，牙周健康的医院职工血清13例(女/男为6/7)。牙周炎牙龈组织为需拔牙治疗的重症成人牙周炎病变组织18例(女/男为7/11)，健康对照为正畸拔牙，阻为齿拔除及龋骤冷，转-70℃保存备用。
　　2. 龈沟液及其处理：成人牙周炎患者初诊患者18例(18牙，女/男为9/8)，牙周健康的职工9例(9牙，女/男为5/4)。龈沟液用Whatman 3#滤纸条收集，每三条滤纸条收集一个牙(颊侧近中、中央和远中牙位)的30秒龈沟液，用0.1%BSA-PBS-T 120μ1离心洗提出滤纸条上的龈沟液，4℃存放备检。
　　3. 免疫组织化学方法：6μm的牙龈组织切片在恒冷箱低温切片机(-30℃)内切成。每片组织贴附于APES(北京中山生物技术有限公司商品)处理后的载玻片上，每例取一张切片，HE染色，观察龈组织的炎症情况。IL-8免疫组织化学方法则用碱性磷酸酶抗碱性磷酸桥联酶标技术(APAAP 试剂盒，北京邦定生物医学公司产品)。每次均作阴性对照：①不加IL-8McAb，以PBS替代；②不加羊抗鼠桥抗和APAAP复合物。阳性对照为预实验检出的IL-8阳性牙龈组织切片。免疫组化以细胞浆内有明显红色颗粒者为阳性。
　　细胞计数：在光镜下，从龈缘开始分别连续计数袋(沟)上皮侧、口腔龈上皮侧(包括上皮及上皮下的结缔组织)和结缔组织中5个视野范围(0.181mm×400)的阳性细胞，取均值作为各例各部位的阳性细胞数。
　　4. IL-8的检测：常规ELISA 夹心法［3］,用系列稀释的重组人IL-8［4］作标准曲线，样本含量由标准曲线算出。

结　果

表1　血清及龈沟液中IL-8的检出结果*
 

组别	样本数	检 出值 (x,μg/L)	检出率(%)	PD(mm)	BI
H-GCF	9	0-316(46)	4/9(44)	＜2	＜2
H-Sr	13	0-0.066	1/13(7.7)	＜2	＜2
P-GCF	18	0-59(14.2)	13/18(72.2)	6.6±1.9	3.4±0.7
P-Sr	17	0-2.94(0.09)	8/17(47)	5±0.23	3.3±0.1

　　*H-GCF，健康人龈沟液；H-Sr，健康人血清；P-GCF，患者龈沟液；P-Sr，患者血清PD，牙周探诊深度；BI，探诊出血指数经x2检验，个组间IL-8的检出率：H-GCF显著高于 H-Sr（p<0.05），P-Sr显著高于H-Sr（p<0.01）；经SPSS统计软件Mann-Whitney检验，各组IL-8的检出量：H-GCF显著高于H-Sr（p<0.01），P-GCF显著高于P-Sr（p<0.01），P-Sr显著高于H-Sr（p<0.05）。

责任编辑：姚红祥